水蛭怎么养水蛭的投饵管理
随着水蛭用价值的深度开发，其市场需求潜力巨大。养殖水蛭的人越来越多，以下是由我整理关于水蛭怎么养的内容，希望大家喜欢!水蛭的饲养方法 沼泽、泥塘养殖：
东亚飞蝗的养殖与管理实验报告_东亚飞蝗的养殖与管理实验报告
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4.2 50日龄鸡增重情况见表2
沼泽、泥塘水生植物茂盛，有机物质、腐殖质含量较多，浮游生物、水生植物丰富，因此，只要建好围栏，防逃、御天敌侵害即可。此种模式投资成本较低，3.2 饮水雏鸡进回后天给予0.01%的饮水，2-3天给予5%的葡萄糖饮水，3-6天用鸡宝-20饮水，之后如无特殊情况则采用温开水饮水。管理、捕捞较麻烦。
稻田套养
在稻田中挖沟渠、溜沟作为水蛭主要活动场所，一般按“井”，“十”等形状开挖，分沟溜式和泥塘式两种。溜沟要求分布均匀，四通八达，有利于水蛭的生长和觅食，一般宽0.4米，水深0.3-0.5米，溜沟面积占总面积10%左右;泥塘式是在稻田内部开挖泥塘，泥塘与稻田沟渠相通，沟宽、沟深均为0.4米左右，深为0.5-0.6米，占稻田面积15%左右，注意稻田施农对水蛭危害。一般选择高效低毒农，也不要使用化肥，用动物粪便较理想，不利于稻子丰收，也是水蛭的好饲料。
水泥池养殖
建水泥池20平米左右，宽3米，长7米，高度1米—1.2米，水深0.5米，做好进、排水设施，室外水泥池中需投放水草等植物，以便水蛭栖息。新建的水泥池不能立即投放种蛭，其池体的碱性物质(硅酸盐水泥、氢氧化钙等)需经过20天的淡化后才能投苗，不能一次性投苗，待养殖池总体环境条件趋向食物链总体平衡以后，才能逐步加大投种量，一般每平米投放100条。
标准化集约精养：
建议池塘长90米，宽7-8米，池深1.2米--1.5米，水深0.5米--0.6米，做好进、排水设施，建设泥土栖息地，高出水面0.3米，上面种水草，以遮阴防晒，使用40目聚乙烯网布做好防逃措施。一般每亩水面积投放种蛭2000条。
水蛭的投饵管理 1、投饵
天然饵料种类以淡水螺类、蚯蚓及部分昆虫为主，规模养殖辅投各种动物血、内和淡水鱼虾贝螺类，以及畜用配合饲料和农作物的秸秆。池塘养殖可投放一定数量的野生螺蛳或福寿螺，量一般为0.05-0.1kg/平方米左右，让其自然繁殖，与水蛭共生共长，供其摄食。放螺数量不宜过多，过多则与主养品种争夺生存空间，主客易势。投喂动物血或拌饵投喂时，应注意间隔投喂和及时清除剩饵，天热时更要注意，以免污染和败坏水质，影响水蛭生长。
2、日常管理
水蛭病害极少，以调节水质为主，水蛭虽然对环境和水质要求不严，但水环境变化过大或变坏，则影响其生长和繁殖。养殖过程中，水温一般保持在10-40℃之间，过肥过污的养殖用水要保持一定的溶解氧，一般水体中溶解氧应大于0.7mg/L，出现缺氧，小水体可通过人工淋水解决，较大的水体要及时注入新水或换水，在夏季高温季节保持较为清新的水质十分重要。
水蛭的理作用 1、对血液的作用
水蛭水提取物对ADP诱导的大鼠血小板聚集有明显抑制作用，亦能明显抑制正常人的血小板聚集，有抗血栓形成的作用。
实验表明：水蛭在体外对纤维蛋白有较强的纤溶作用，其活性显著高于丹参和大黄;在体内亦有纤溶活性，能使家兔优球蛋白溶解时间(ELT)显著缩短。因此水蛭能活化纤溶系统，溶解血栓。亦有报告指出，水蛭素对实验性血栓形成有明显抑制作用，对凝血酶所致之实验性静脉血栓有溶解作用。
2、对心血管系统的作用
有报告指出，水蛭对心肌营养性血流量有一定程度的增加作用;对组织缺血缺氧有保护作用。水蛭素能对抗垂体后叶素引起的家兔冠状动脉痉挛，有抑制心肌缺血的治疗作用。水蛭能明显消退主动脉粥样硬化斑，使斑块内胶原纤维增生，胆固醇结晶减少。提示水蛭对防治动脉粥样硬化有潜在的应用价值。
水蛭有扩张毛细血管、改善微循环、增加肾血流量的作用。其改善微循环的作用，与肝素相仿，只是作用时间短暂。实验表明：水蛭有扩张外周血管、增加血流量和减少血管阻力的作用，该作用与盐酸碱作用相似。
3、对妊娠的作用
实验表明：水蛭对小鼠各个时期妊娠(包括着床及妊娠的早、中、晚期)均有终止妊娠作用。不同给途径对早期妊娠均有良好终止作用。若将外源性孕酮与水蛭同时注射，则可防止早产。水蛭对蜕膜病变有抑制作用。
4、其他作用
水蛭对实验性高脂血症家兔的胆固醇和甘油三酯有明显降低作用。
水蛭的营养价值 水蛭为无脊椎软体动物，无骨架结构，全体均可利用。
水蛭的主要成分是蛋白质、多肽、微量元和脂肪酸素等。
1、蛋白质：水蛭干粉中氨基酸的含量高达62%，是肌肉蛋白质含量23.3%的2.7倍;同时在这17种氨基酸中，以谷氨酸、天门冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸的含量较高，它们在水蛭的保健中起着很重要的作用。
2、多肽：吸血水蛭中含有由多个氨基酸组成的低分子多肽，它是吸血水蛭发挥效和保健功能的主要活性成分。
3、微量元素：菲牛蛭体内含有钙、铬、铜、铁、镁、锰、钒、锌8种元素， 其中钒、锰、铜、铁、锌元素是人体内必需的微量元素。锌和铁的含量较高，分别为1.4mg/g 和1.36mg/g。锌元素的含量比大豆中的锌含量高8倍，比猪肝中的含量高2倍。说明菲牛蛭对锌元素具有极强的富集能力。在自然界中锌的含量相对较少，而它是维持人体正常生理活动重要的元素，而人体不能自身生成，只能依靠体外供应。研究还表明，锌元素广泛地参与蛋白质酶、糖类、、脂肪的代谢等基本生化过程，已知有300多种酶的活性与锌有关。并且锌能提高人体免疫力，具有抗癌功能。人体随着年龄的增长，体内微量元素的含量逐渐减少，锌尤为显著，引起酶类蛋白质的损害，加速衰老的进程和疾病的发生。因此，为保持体内适宜的微量元素浓度， 就需要服用富含微量元素的食物。
养蚂蚱一年能挣多少钱和怎样养殖？
经过饲养，取得的结果，可以清楚的看出，饲养麻花鸡比艾维茵鸡要好，它有白羽肉鸡不可代替的优点。青青特种养殖有限公司由省、市门审批，在部门注册，是一家集蝗虫养殖、蝗虫养殖技术培训、蝗虫种苗提4.出现完全凝集的抗原的稀释度，即为该抗原的凝集价。供、蝗虫产品回收、蝗虫产品深加工及成品销售与一体的蝗虫产业公司。
15日龄 96%养一种小动物的科学研究报告
水蛭水提取液能降低大鼠的全血比黏度和血浆比黏度。缩短红细胞电泳时间。临床研究表明：水蛭对缺血性脑血管病患者因血液流变性异常而出现的浓、黏、聚状态有改善作用。柳州麻花鸡的饲养报告
1.材料和方法由于近几年来，蛋价下跌，蛋农骤减，加之近两年来生猪价格也下跌，造成养殖户积极性降低，数量减少，而本地土鸡的价格仍居高不下，高达13元每公斤，但生长速度慢。为了证明广西柳州麻花土杂肉鸡在湘潭农村是否有广阔的养殖前景，我们进行了本次饲养试验，现将实验结果报告如下：
1.1 供试验鸡种由柳州市禽工商实业公司驻湘分部提供的麻花鸡404羽，由岳阳正大提供的艾维茵肉鸡202羽。
1.2 试用饲料是由河南东方正大饲料有限公司提供的510、511、512、513等鸡料，其中每200只鸡喂510料3袋，511料6袋，512料5袋，513料2袋(艾维茵鸡多一袋513料)。
1.3 试验分组
分A、B、C三组，A、B两组麻花鸡，C组为艾维茵肉鸡，各组分别是200羽。
1.4 测定项目与方法
①分别在15日龄、30日龄、50日龄检测鸡的成活率。②分别在30日龄、50日龄，每组抽样10只来测定体重平均值，③分组计算其利润。
2.鸡舍及用具的准备
2.1 进雏前准备三间鸡舍作为育雏室，分别进行冲洗，然后采用1∶200农乐喷雾消毒。隔1天之后再用同浓度的农乐喷雾一次。
2.2 搭建鸡舍，鸡舍用竹子扎架，四周及顶棚用编织袋和草垫封盖，这些材料均用农乐喷雾消毒后方能使用。在鸡舍内壁，从地面往上，大约半米高，用纸壳(如纸箱剪开)围着，这样既能防止鸡啄编织袋又能保温。整个鸡舍长宽各2米，高1.5米。三个鸡舍均相同，直到25日龄之后，再将鸡舍扩大一倍，保证适宜温度，以利鸡活动。
2.3 舍内、舍外均用1∶200农乐喷雾消毒(A、B、C三组均是)，1天后用甲醛蒸汽消毒，3天后通风(2天)再用消毒。
2.4 用具准备①壁炉将其置于鸡舍，通风管从顶部伸出舍外。②垫料因采用地面平养，垫料可选用谷壳，垫料应在10厘米左右，然后在上面铺一层报纸，壁炉下应垫几块砖，不能与报纸直接接触，防止着火。③料桶及饮水器每间鸡舍配备3个饮水器和3个料桶，25日龄之前将料桶置于地面，25日龄之后将料桶和饮水器用绳子悬于空中，以鸡能吃到为宜。④温度计和灯泡温度计可悬挂于鸡舍内一角，距离地面约50厘米。灯泡可悬于与温度计相对的一角，大约为25瓦，距地面约1.2米。
3.饲养过程
3.1 升温雏鸡购回前鸡舍内应进行预温，使鸡舍内保持33～35℃的温度，雏鸡购回后，应将雏鸡立即放入鸡舍。
3.3 开食在进雏2-3小时后开始给食，之前只给饮水，以促进卵黄的吸收。饲料中不添加任何物，先喂给510料(3袋)，喂完之后再喂511料等。
3.4 光照由于鸡舍用纺织袋，草垫等封盖，里面光线较暗，因此必须延长光照时间，遇到停电等特殊情况，可采用应急灯照明，或蜡烛照明。
3.5 日常管理一个优良品种的肉鸡的生长速度的快慢，受许多因素的制约，如饲养设施、鸡舍类型、气候、季节、环境、卫生、应激性等等，因此饲养管理应根据这些因素制定合理的科学管理方法，以达到良好的饲养效果，取得的经济效益。
?ケ敬问匝槿?组鸡全采用自由采食，因此每隔一定时间要加饲料和水，并且每隔一定时间换煤。饮水器每隔3天清洗一次，在加饲料、换水及换煤的同时注意一下鸡的分布情况，如雏鸡散离热源，并张翅张口呼吸，则说明温度过高；如果小鸡偏向舍内一侧，说明有风侵袭；雏鸡均匀的卧在地面或热源下伸腿休息，没有叫声，则温度适宜。可用控制壁炉火门的大小来调节温度。25日龄之后，料桶及饮水器都悬挂起来，这样一来可防止鸡将粪便、垫料扒入其中，另外也可防止鸡将其打翻，悬吊的高度以鸡吃得到为佳。另外，每隔10天左右换一次垫料，除次外，以后都不再铺报纸。
3.6 防疫
①制造一套合理的每日饲养管理程序，不要在舍内或周围高声喧哗，以免鸡产生应激反应综合症。②注意观察鸡群：病鸡一般精神不振，两眼紧闭，羽毛蓬松，不食或食欲不振，对出现的病状分析原因，及时治疗。③预防：对于健康鸡群应选用物积极预防疾病的发生，饲料中，8日龄加入万分之一的土霉素，连用7天停，3天后再连用7天，如此循环，饮水中3-6天用鸡宝-20饮水，15日龄时饮水中加入克球灵(磺胺喹恶啉)水溶性粉剂。当出现球虫病时(典型症状为便中带血)，可用万分之四的痢特灵混饲进行治疗。此外，在7日龄时，用鸡瘟Ⅱ系苗滴鼻，14日龄时喂法氏囊苗。并且每隔3天用农乐对鸡舍周围进行消毒。禁止其他外人参观。
4.结果及分析
??3组鸡从进舍到育成共50天，各项检测结果如下：
4.1 雏鸡成活率见表1
表1 雏鸡成活率
日期 A组 B组 C组
30日龄 98% 94%
50日龄 98% 93%
表2 (单位：克)
日期 A组 B组 C组
15日龄 350 300 450
50日龄 1505 1465 2100
注：以上体重值均是任取10只鸡来检测后得出的平均值。
4.3 经济效益计算
A组：育成200羽，总重306.2千克，售价10元/千克，总值3062元。苗价2.8元/只×200只=560元。料价：16袋，总值1470元，人工升温材料费149元，价、电费50元。合计利润：3026-2789=273元。
??B组：育成196只，总重298.1千克，售价10元/千克，总值2981元。苗价2.8元/只×200元=560元。料价：16袋，总值1470元。人工升温材料费149元，价、电费100元。合计利润：29-2839=223元。
??C组：育成186羽，总重390.6千克，售价6.8元/千克，总值2656.08元。苗价：3.2元/只×200只=640元，料价：17袋，总值1556元，人工升温材料费149元，价、电费150元。合计利润：2656.08-2496=160.08元。
4.4 综合分析
5.通过饲养得出麻花鸡确实具有以下优点
5.1 肉质细嫩，味道比白肉鸡要好。
5.2 个体较小，羽色接近土鸡，易被人们接受，且价格也近于土鸡。
5.3 抗病力强，成活率高(在三组试验过程中C组所投入在水蛭所含的17种氨基酸中，其中7种为人体必需氨基酸，其含量为1535mg/100g干重，占全部氨基酸总数量的72%。的精力还高于A、B两组)。
5.4 生长速度快，料肉比2.1∶1，50日龄均可达1400～1500克。
6.饲养过程中应注意的问题
6.1 柳州麻花鸡的饲养主要抓住育雏阶段(1-7天)，要注意保温、防冻。
6.2 此鸡宜在45日龄左右出售，否则随着饲养时间的加长，料肉比会逐渐降低。
6.3 应切实注意搞好防疫工作。
蝗虫养殖技术和养殖的时间？
30日龄 1075 1000 1450蝗虫养殖时间北方在阴历2月至10月中旬，南方一年四季均可养殖，北方可收获 四、小结三批，南方可四批，北方如用温室养殖，也可收获四批。
1.用长入鸡心或翅下静脉，采血，采血量视用量而定，5%抗凝剂与全血的比例为1∶3～4。飞蝗采集食物时，要十分注意避免采用带农的食物。如对采集来的食物认为没有把握时，可在水中清洗后进行喂
上网看一下万欧斯蝗虫养殖，他们还有昆虫高蛋白食品加工，包收购的
养殖过程中一定要精心 避免不必要的损失 同时一定要保证蚂蚱的饲草量充足
血凝实验作报告
流感颗粒表面的血凝素（HA）蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，HA试验由此得名。HA蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰HA蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。随着养殖业的飞速发展和广大养殖户科学意识的不断提高，人们普遍认识到实验室检测技术在临床应用的重要性，发病率越来越高。下面我为大家整理了关于血凝的实验报告，希望对你有锁帮助！
篇一：禽流感血凝和血凝抑制试验
禽流感血凝-血凝抑制试验作方法及注意事项
禽流感血凝和血凝抑制试验可用于血清中抗体水平的监测，也可用于判断未使用群体的感染状态等。该试验是目前世界卫生组织和动物健康组织进行全球流感监测所普遍采用的方法，而且因其具有经济、快速、可靠、作简便、能够处理大量的样品，并能在短时间内报告禽流感抗体水平等优点，已经成为当前基层兽医实验室禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。但因该试验受人为作影响较大，经常因作不规范、不严谨等造成结果偏大、重复性等问题，现根据几年来的工作经验对该试验过程中应注意的事项做一探讨。
一、 血凝试验作程序
1、取96孔90°V形酶标板，用微量移液器在至第五排的1~12孔每孔加25 μL PBS液。
2、吸取25 μL标准禽流感抗原加入到排第1孔中充分混匀。
3、从第1孔吸取25 μL混匀后的抗原液加到第2孔中，混匀后吸取25μL加入到第3孔中，依次进行倍比稀释至第二排一孔即第24孔，弃去25 μL。第三排孔至第四排孔同上作。
4、依次向至第五排孔的每孔中加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。
5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒，室温（20-25℃）静置30 min观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下）。
6、结果判定：将板作45°倾斜，观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集（不流淌）的抗原或稀释倍数为1个血凝单位（HAU）
二、血凝抑制试验作程序
1、根据血凝试验结果配制4HAU抗原。（即1HAU抗原除以4）
2、取96孔V形酶标板，用移液器在第1~12孔各加入25 μL PBS。
3、在第1孔加入25 μL被检血清，充分混匀后移出25 μL加至第2孔，依次类推，倍比稀释至第12孔，弃去25 μL。
4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清（各做两份），作对照孔。
5、在第1~12孔各加入25 μL 4单位抗原，置于微量振荡器上轻轻混匀，室温20-25℃下静置30 min。
6、每孔加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀，室温（20-25℃）静置40 min后观察结果，若环境温度过高，可于4℃条件下进行，红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。
7、结果判定：只有阴性对照孔血清滴度不大于2 log2，阳性对照孔误不超过1个滴度，试验结果才有效。 将酶标板作45°倾斜，以完全抑制红细胞凝集的稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2，判为禽流感抗体阳性。
三、试验过程中的注意事项
1样品的保存及试验前处理
1.1 采集的血液样品应及时分离血清，分装至离心管中，标记清楚，离心后吸出血清，对应编号冷藏送检，并禁止运输过程中剧烈震动。
1.2 一般情况下，在5天内检测的样品可放置在4℃的冰箱中冷藏，否则低温冷冻保存。
1.3 在检测前血清样品应充分混匀，混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可，切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。
1.4 对出现胶冻状的血清样品，可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清，可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。不建议直接吸取其中少量的清亮血清。
1.5 水禽等样品为排除非特异性反应，还应相应进行灭能反应。具体作方法：56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞，轻摇后静置30分钟，离心，收集上清液即可。
2器材的选择
2.1 酶标板的选择：
建议使用96孔90°V型板进行试验，通过反复试验证明：90°V型板相对于110°板及130°板来讲，具有红细胞沉降速度快，产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。
2.2 移液枪的选择及使用：
①单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程，以便度的提高。
②使用时应采用一档吸液二档排液的方法。吸取液体时，枪头要深入液下缓慢平稳吸液。加缓冲液时
应加在板孔底部。倍比稀释血清时，应每孔至少反复吹吸6次，以便混合均匀，还应注意尽量避免产生泡沫引起混合不均。加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样，以免交叉污染，影响试验结果。
③加样、倍比稀释时应高度集中注意力，以免漏加、重复加样等。
3试剂的保存及配置
3.结果判定：红血球在反应板底部全部均匀铺开为完全凝集（++++），在血凝板底部集为一小红点为沉淀（－），如底部为一小红点，四周为凝集的红细胞，则为不完全凝集（++）。3.1 禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求进行保存和配置，试验前应提前将其恢复至室内温。抗原的保存温度为-20℃，反复冻融会降低抗原的滴度，应避免反复冻融。
3.2 PH7.2、0.01mol/L的PBS液的制备
①应尽量现用现配
②每次使用前应测PH值，以免时间过长而导致PH值发生改变。
③由于PH试纸跨度范围偏大，PH值不易准确介定，因此采用酸度计准确测量PH值，以提高试验的度。
④全部试验均采用同一种稀释液。
3.3 1%红细胞的制备
①为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象，因此配制1%红细胞悬液时应选择采取2-3只SPF鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝剂，如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。
②采血完毕后分装至2ml容量的圆底离心管中，因为通过2ml与1.5ml两种容量离心管相比较，放入1.5ml尖底离心管中的话，离心后，离心管底部红细胞不易与加入的PBS液混匀，易沉积在管底部，达不到洗脱干净的目的。
③经2000~3000r/min，5~10min，弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜，再加入十倍以上血量的PBS液，上下缓慢颠倒（切忌用力过大使红细胞破裂），使其充分混匀，再离心弃去上清液，反复几次直至上清液清亮透明为止。
④在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞均匀，使其每孔加入相同数量的红细胞。
⑤制备好的红细胞液如果放置后上清液变红，说明有溶血，不可再使用。
3.4抗原液的配制
①先做血凝试验测定效价，以抗原与红细胞完全凝集的孔为1HUA抗原，配制4HUA抗原应往前推算两孔，即除以4后的值。
②每次做试验前，必须重新检测禽流感抗原的血凝效价，以免效价发生改变而导致抗原稀释倍数不准确，从而导致试验结果不准确。
③为保证配制的抗原准确，还要进行抗原回滴试验。具体方法：做二排抗原回滴，在两排的第1~8孔各加25微升PBS，取4HAU抗原25微升加在两排的第1、第2孔，混匀，从第2孔倍比稀释至第4孔，弃去25微升，另一排同样。从第2至第8孔补25微升PBS，以保持75微升总量不变，另一排同样。两排的第1至第8孔各加25微升1%红细胞，震荡10秒钟。静置30分钟观察结果。这样在第1孔为4HAU抗原，第2孔为2HAU抗原，第3孔为1HAU抗原，第4孔为1/2HAU抗原，均为75微升总量，第5至第8孔为空白对照。如果抗原回滴试验不成立，应相应调整抗原浓度直至回滴试验成立。因为如果抗原浓度过高，则所测定的抗体效价水平偏低，如果抗原浓度过低，则所测定的效价偏高。所以不调整抗原浓度至实验成立的话会对结果有很大影响。
4结果的判定
每次试验必须设阳性及阴性（空白）对照血清，判别试验是否成立。判读结果时，将酶标板倾斜45°，以孔底沉淀的红细胞流动性好，呈泪珠样流淌，边缘无凝集颗粒为凝集完全抑制。
5试验器具的清洗
每次试验完毕后，应将酶标板中液体甩净，然后用自来水反复冲净每个孔，再放入3%NaOH中4小时，清水反复冲净，再放入3%Hcl中4小时，清水反复冲净，再用蒸馏水反复冲洗几次，甩干水份，入干燥箱中干燥备用。实验用烧杯、加样槽、量筒等也应充分洗净、干燥。以免器具内有杂物、污物以及残留物从而影响试验结果。
在进行禽流感血凝抑制试验时，应充分考虑到各方面的影响因素，提供的检测结果才会真实可靠，准确掌握禽类的'免疫抗体水平，进而为科学防控禽流感提供理论依据。
篇二：血凝抑制试验
血凝抑制（HI）试验
（以禽流感为例）
一、原理
二、应用
三、缺点
只有当抗原和抗体HA亚型相一致时才能出现HI现象，各亚型间无明显交叉反应；除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素；需要在每次试验时进行抗原标准化；需要正确判读的技能。
四、试验步骤
1 阿氏（Alsrs）液配制
称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100mL，散热溶解后调pH值至6.1，
69kPa 15min高压灭菌，4℃保存备用。（3.8%枸橼酸钠（3.8g枸橼酸钠，100ml超纯水），101 kPa,20min高压灭菌，4℃保存备用,保存期1个月）。
2 10%和1%鸡红细胞液的制备
2.1采血
用注射器吸取阿氏液约1mL（3.8%枸橼酸钠），取至少2只SPF鸡（如果没有SPF鸡，可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡），采血约2～4mL，与阿氏液混合（3.8%枸橼酸钠），放入装10mL阿氏液（生理盐水）的离心管中混匀。
2.2 洗涤鸡红细胞
将离心管中的血液经1500～1800 r/min 离心8分钟，弃上清液，沉淀物加入阿氏液（生理盐水），轻轻混合，再经1500～1800 r/min离心8分钟，用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜，再重复2次以上过程后，加入阿氏液20 mL（生理盐水），轻轻混合成红细胞悬液，4℃保存备用，不超过5天。
2.3 10%鸡红细胞悬液
取阿氏液保存不超过5天的红细胞，在锥形刻度离心管中离心1500～1800 r/min 8分钟，弃去上清液，准确观察刻度离心管中红细胞体积(mL)，加入9倍体积(mL)的生理盐水，用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。（此步
可省略，直接配制1%红细胞）
2.4 1%鸡红细胞液
取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1 mL，加入9 mL生理盐水，混合均匀即可。（根据检测血清的数量，估算一下需要的1%鸡红细胞量，可按0.3ml/每份血清）
3 抗原血凝效价测定（HA试验，微量法）
3.1 在微量反应板的1孔～12孔均加入25μl PBS（生理盐水），换滴头。
3.2吸取25水蛭素对肿瘤细胞有抑制作用，对小鼠肝癌生长有一定的抑制作用。由于水蛭有高抗凝作用，因而有利于抗癌及免疫活性细胞浸入癌组织杀伤癌细胞。μl抗原加入第l孔，混匀。
3.3从第1孔吸取25μl，液加入第2孔，混匀后吸取25μl加入第3孔，如此进行倍比稀释至第11孔，从第11孔吸取25μl弃之，换滴头。
3.4每孔再加入25μl PBS（生理盐水）。
3.6振荡混匀，在室温（20～25℃）下静置40min后观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下反应1小时）。对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。
3.7结果判定 将板倾斜，观察血凝板，判读结果（见下表）。
表1：血凝试验结果判读标准
能使红细胞完全凝集（凝集，++++）的抗原稀释度为该抗原的血凝效价，此效价为1个血凝单位（HAU）。注意对照孔应呈现完全不凝集（-），否则此次检验无效。
4 血凝抑制（HI）试验（微量法）
4.1 根据3的试验结果配制4HAU的抗原。以完全血凝的稀释倍数作为终点，终点稀释倍数除以4即为含4HAU的抗原的稀释倍数。例如，如果血凝的终点滴度为1:256，则4HAU抗原的稀释倍数应是1:64（256除以4）。
4.2 在微量反应板的1孔～11孔加入25μl PBS（生理盐水），第12孔加入50μl PBS（生理盐水）。
4.3 吸取25μl血清加入第1孔内，充分混匀后吸25μl于第2孔，依次倍比稀释至第10孔，从第10孔吸取25μl弃去。
4.4 1孔～11孔均加入含4HAU抗原25μl，室温（约20℃）静置至少30min。
4.5 每孔加入25μl 1%的鸡红细胞悬液混匀，轻轻混匀，静置约40min（室温约20℃，若环境温度太高可置4℃条件
下进行），对照红细胞将呈现钮扣状沉于孔底。
4.6 结果判定
试验成立的条件：只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2，阳性对照孔血清误不超过1个滴度，试验结果才有效。
以完全抑制4HAU抗原的血清稀释倍数作为HI滴度。
HI价小于或等于31og2判定HI试验阴性；HI价大于或等于41og2为阳性。
五、HI试验注意事项
1、合理选择抗原和对照阳性血清。针对Re-4和Re-5株免疫采用相应抗原和对照阳性血清。
同一亚型的禽流感制成的抗原，如果毒株来源不同，则可能会存在抗原性异，从而使检测同一血清的结果有别。一般来讲，种毒株如果与抗原所用毒株相同时，则所测得的HI效价较高。
2、合理使用和保存抗原。反应试剂要按规定保存和使用，冻干的试剂应按照说明中规定的体积重新溶解并保存。要避免杂菌污染，因为污染所造成的非流感起源的凝集素也可与所有抗血清发生非特异反应。为避免反复冻融和细菌污染，可以无菌作将试剂分装成小包装。
3、反应温度不能太高。若在37℃ （如温箱）下进行。
篇三：血凝和血凝抑制试验
随着养殖业的飞速发展和广大养殖户科学意识的不断提高，人们普遍认识到实验室检测技术在临床应用的重要性。下面简单介绍一下鸡新城疫微量血凝试验和血凝抑制试验的注意事项及作方法。
应用：
用于新城疫、产蛋下降综合征和传梁性支气管炎等的母源抗体的检测、雏鸡首免日龄的确定、免疫后的免疫应答的监测、临床鸡病的鉴别诊断等。
下面以新城疫为例，介绍血凝和血凝抑制试验的方法：
注意事项：
一、样本要具有代表性：所采样本要能代表整体，通常采用四角加中间的随机取样法，并且确定适当的样品数量，一般1000只以下的鸡群采样率在2～5%；5000只以下1～2%；5000只以上0.5～1%。对产蛋期间的鸡群可采鸡蛋；对雏鸡或青年鸡，可采血。方法是：取青霉素小瓶，洗净后用蒸馏水冲洗、控干水分，并注意不要用消毒剂，以免影响结果。每只鸡采血量在1ml左右，不低于1ml，在室温下静置至血清自然析出。
二、四单位抗原的准确性：要获得准确的监测效果，先做红血球的凝集试验，即测得抗原的血凝价，尔后前移2孔作为四单位抗原的稀释度。
三、红血球洗脱的充分性：原则上，新城疫检测所用的红血球应来源于非免疫过的健康公鸡，但实际上却多采用免疫过的健康公鸡，有时甚至是病鸡。因此，对红血球的洗脱的次数要多、要充分，并注意转速和时间，通常采用五次变速离心法：前四次为每分钟1500转，每次5分钟，一次为每分钟3000转，持续7～8分钟。另外，洗红血球过程中，应注意动作要轻，玻璃仪器之间尽量减少碰撞，以免造成红血球破裂而影响结果。
四、结果判定的及时性：检测中，每次试验均应设抗原与生理盐水对照，加入红血球后，每隔5分钟观察一次，一旦两列对照孔图像清晰地显示出来时，应立即对样本进行结果判定，过早过晚都会影响判定结果的准确性。
血凝与血凝抑制试验的作方法
一、材料与仪器：新城疫抗原、1%鸡红血球、抗凝剂、生理盐水、被检血清、离心机、吸管、滴管、洗耳球、烧杯、量筒、注射器、长针头、96孔V型医用血凝板、微量移液器、微量振荡器、恒温培养箱、冰箱等。
二、方法：
1%鸡红血球的制备：
2.洗血球：共洗4～5次，每次5～8分钟，红血球与生理盐水的比例至少为1∶2～3。离心机转速为每分钟1500～3000转，倾去上清。
3.吸红血球泥1ml加生理盐水99ml，配成1%红血球备用。
三、血凝试验：
1.血凝板上12个孔内全部加入生理盐水，每孔0.05ml，吸等量新城疫抗原于孔内，混匀后吸出同量于第二孔内混匀，以此类推稀释至第11孔，并弃去0.05ml，留第12孔作为生理盐水对照，然后全部孔内加入1%鸡红血球。
2.将血凝板置于振荡器上振荡1～2分钟，使材料充分混均，放入恒温培养箱，每5分钟观察一次，至10～15分钟取出，一般以生理盐水对照孔的图象清析地出现为准。
5.四单位抗原的制备：血凝试验的结果如为28（256），则前移2孔即26（64），作为四单位抗原的稀释度。即：63ml生理盐水+1ml抗原即为四单位抗原。
四.血凝抑制试验：
1.血凝板上1～11孔全部加入0.05ml的生理盐水，于孔内加入等量的被检抗体，稀释至第10孔，弃去0.05ml，再加入等量的4单位新城疫抗原至第11孔，第11孔为抗原对照，12孔为生理盐水对照。在振荡器上振荡1～2分钟，放置室温约20分钟，然后加入等量的1%鸡红血球，振荡后放入恒温培养箱大约10～15分钟后进行结果判定。
2.结果：能完全抑制红细胞凝集的被检抗体的稀释度为该被检抗体的血凝抑制滴度。
注：1、HI价在23～24时免疫可产生良好的免疫应答，如在疫区可提高到24～25免疫。
2、24～25 注：#为完全抑制，++为不完全抑制，－为不抑制。 说到养蚱蜢的好处。 这四个棚子的投资约2300元，已经卖掉了，3.5每孔均加入25μl 体积分数为1%鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）。现在收入15000元左右。 现在二茬这么大，一个月就出来了，得赚一万元左右。 与种地相比，收入相当可观，比种地还好。 它的效益是非常不错的，投资比较小，回报特别高，对饲养条件的要求不是特别高，现在有许多人已经开始把蝗虫作为一种食物 一直都在赔钱，而且现在也没有什么销路，养殖成本和周期很长，不适合种植。现在看到农村很多大棚饲养蝗虫的，它的效益如何？
该试验是目前WHO进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。可用于流感分离株HA亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。